將*培養(yǎng)基吸出保存在4℃環(huán)境下，培養(yǎng)瓶內(nèi)留有5ml供細胞生長。經(jīng)觀察，SY5Y的密度在80%左右，放至二氧化碳培養(yǎng)箱（37℃，5%二氧化碳）培養(yǎng)。

       使用含有EDTA的胰酶消化進行1：3傳代，約30S細胞成塊脫落，這說明消化過度。含有EDTA的胰酶消化能力強，下次傳代應注意縮短消化時間。消化過度，細胞成塊脫落，不易吹散。

       傳代后，成團的細胞不利于營養(yǎng)物質(zhì)的獲取和代謝廢物的排出，嚴重影響增殖，甚至導致凋亡。下午5時觀察，細胞均已鋪開貼壁，密度較大，狀態(tài)良好。為保險起見，在最初的培養(yǎng)中，使用的培養(yǎng)是*培養(yǎng)液。使用完畢后，得自己配：1640+15%滅活FBS+1%雙抗+1%谷氨酰胺。將FBS在二氧化碳培養(yǎng)箱放置35分鐘進行滅活。本來FBS凍存的，需在室溫下恢復室溫，方可放置于二氧化碳培養(yǎng)箱中。將泡酸的玻璃培養(yǎng)瓶、滴管、200ml玻璃瓶和尖底玻璃離心管清洗并高壓后風干。

       介紹下SH-SY5Y:中文名稱人神經(jīng)細胞母細胞瘤細胞，該細胞分化低、繁殖快、細胞形態(tài)、生理和生化功能與正常神經(jīng)細胞相似。被廣泛應用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)病機制研究和藥物作用機制方面的研究

       [1]。該細胞可以產(chǎn)生兒茶酚胺和多巴胺，磁刺激的頻率和時間顯著影響兒茶酚胺的代謝！而兒茶酚胺與抑郁癥有關(guān)，因此，有人對體外培養(yǎng)的SH-SY5Y施加rTMS，探究rTMS可能存在的對抑郁癥的影響

       [2]。該細胞還可以表達淀粉樣前體蛋白（amyloid precursor protern）和β淀粉樣蛋白（β-amyloid ）

       [3]。這個兩種蛋白與AD的發(fā)病機制有關(guān)。

       如需了解更多技術(shù)知識，歡迎聯(lián)系上海喆圖科學儀器有限公司。